SnapGene安装教程
1、下载解压压缩包文件，得到setup安装程序以及crack破解补丁文件；
2、双击exe文件开始安装，根据提示选择安装路径，点击next；
3、接受软件许可协议，点击i agree；
4、安装附件，根据自身需要选择即可，无特别原因默认安装，点击next；
5、根据提示安装完成，点击finish，将启动勾选去掉；
6、找到之前解压文件，将crack中的ActivationCrack.exe复制到安装目录中；
默认路径：C:\Program Files (x86)\SnapGene；
7、替换成功后软件破解成功，尽情使用吧！
软件功能
In-Fusion 克隆
Clontech 的 In-Fusion 克隆技术是创建无缝基因融合的一种非常通用的方法。 该软件是第一个模拟此程序的软件。 只需选择您想要融合的 DNA 片段，即可设计引物。
Gibson Assembly?
许多研究人员转向 Gibson 组装，在不使用限制性酶的情况下将片段插入质粒中。待连接的 DNA 片段通过 PCR 扩增以产生重叠的末端。软件简化了Gibson组装反应的计划，并自动化了引物设计。
限制性克隆
独特的限制克隆界面以干净的布局显示您需要的信息。克隆程序的规划从来没有这么简单过。如果你已经知道你想做什么，克隆模拟只需要几秒钟。如果克隆过程存在设计缺陷，则可以在模拟过程中捕获并纠正错误。
聚合酶链反应与诱变
设计引物后，它们可以用来模拟常规 PCR、重叠延伸 PCR 或诱变。得到的DNA序列文件可立即用于进一步操作。与限制克隆界面一样，以引物为中心的界面以直观的方式显示关键信息。
自动保存
最令人惊讶的是它自动记录了克隆项目中的步骤。每次编辑序列或模拟克隆、PCR 或诱变时，程序都会自动记录在图形历史中。在模拟 DNA 构建体的创建之后，您可以使用历史作为实验方案。
琼脂糖凝胶电泳
如啊你按使用一种先进的算法来创建真实的琼脂糖凝胶模拟。限制性片段以三种形式显示:模拟凝胶、数值列表和序列图。您可以使用模拟凝胶计划诊断限制摘要，或将实际凝胶图像与预测模式进行比较。
酶位点
SnapGene 以清晰的方式突出限制位点，自动标记甲基化阻断的位点。简单的控制可以让你选择有用的酶组，比如“独特的切割器”，或者定义自定义酶组和首选供应商。信息工具提示提供关键数据。“限制酶”窗口显示了数百种商用酶的详细特性。
软件特色
1、为DNA和蛋白质序列添加了多个比对工具。
2、实现了macOS的选项卡式窗口支持。
3、已启用将CSV格式的数据库导入集合。
4、为LabArchives ELN添加了文件交换工具。
5、允许的序列跟踪导出为FASTA和纯文本格式。
6、添加了Biotium MW标记物。添加了“φ29 – HindIII”MW标记。
7、添加了“λDNA – EcoT14I”MW标记。
8、添加了Enzynomics MW标记。
SnapGene使用教程
限制性克隆的技巧
对于许多应用，常规限制性克隆仍然是最好的方法。一些简单的技巧将有助于确保您的克隆顺利进行。
1、一般技巧
首先，在程序的每一步都要小心。从长远来看，这种方法可以节省时间。
确保DNA非常干净。当制备载体或切除待插入的片段时，从约2μg的DNA开始。
每次酶促反应后，用旋转柱纯化DNA。在40-45μl的10mM Tris（pH8.5）中洗脱DNA，然后进行下一步反应。（在用凝胶纯化DNA片段之前不需要使用旋转柱。）
为了最大限度地提高效率，请尽量减少程序中的步骤数。例如，将钝端片段克隆到钝性载体位点（例如SmaI位点）比将其用Klenow或T4 DNA聚合酶钝化的位点更好。
如有疑问，用凝胶纯化DNA片段。更清洁的起始材料将产生更好的结果。
2、准备矢量
限制性克隆最常见的问题是在手术后恢复起始载体。该问题有两个原因：载体的不完全消化，以及切割载体与其自身的重新连接。下面描述的技巧将最大限度地减少这些影响。
确保载体的消化完成。使用过量的限制酶（约20 U，2μgDNA），消化约4小时。如果载体需要用两种具有不同最佳反应缓冲液的酶切割，则依次进行消化，并在其间进行旋转柱纯化。
消化载体（并且如果合适的话钝化），用磷酸酶处理：在37℃下1小时处于5'突出端，或者如果DNA具有任何平末端或3'突出端则在50℃处理1小时。
用旋转柱除去磷酸酶。通常不需要对载体进行凝胶纯化，因为磷酸酶处理会使产生的任何额外DNA片段失活。
3、使用载体，确保消化和磷酸酶反应完成。彻底和反复地涡旋混合物，并且不允许任何液滴逃脱酶处理。在涡旋后短暂旋转以确保管侧没有留下液滴是个好主意。
准备插入的片段
为了制备插入的片段，不完全消化不是一个严重的问题，因为片段的部分回收是可接受的。您可以使用相对较短的消化时间，对于双重消化，您可以使用对一种或两种酶来说不是最理想的反应缓冲液。
用凝胶纯化插入的片段。除去除不需要的或不完全消化的DNA外，该方法还可去除酶和小分子。当用透照仪观察DNA条带时，不要使用312nm或更低的短波紫外线，因为DNA会受到严重损害。请改用360-365 nm紫外灯。
如果通过PCR产生插入的片段，则在进行任何限制性消化之前用凝胶或旋转柱纯化。如果您计划将平末端PCR片段（用聚合酶如Pfu产生）克隆到磷酸酶处理的载体中，请确保您的PCR引物含有5'-磷酸。
结扎和转化
使用磷酸酶处理的载体，进行对照连接，其中省略插入的片段。该对照连接应该产生非常少的转化体，因为只有环状DNA分子有效地转化大肠杆菌，并且在不与磷酸化片段连接的情况下不能发生载体的再环化。
如果DNA仅有粘性末端，则在室温下连接约1小时。如果DNA具有任何平端，则在室温下连接约4小时并使用高浓度T4连接酶。
微量制作和诊断摘要
如果您使用插入的片段获得了比用于对照连接的结扎更多的转化体，那么您的克隆几乎肯定会起作用，并且您通常只能制作3-4个小量制备物。
在执行小量制备的诊断限制摘要时，始终包括起始向量作为参考标准。
菜单中英文参考对照
菜单项：
1.file文件
new dna file：打开一个新的dna文件(可以选择是链状的还是环状的)
new file from selection 选取一段序列做为一个新文件
import from genbank ：输入genbank号 即可属于序列
blast ：基因序列和蛋白序列进行blast对比
2.edit编辑
copy top strand 复制顶链
copy bottom strand 复制低链
paste reverse complement 复制反向互补链
select all 全选
select range 选中你要求的序列
make uppercase 大写
make lowercase 小写
insert bases 插入基因
edit dna ends 编辑dna末端
change methylation 改变甲基化(酶切位点可能有影响)
find 查找基因序列
go to 达到对应号码的基因
3.view查看
map 显示图谱
sequence 显示序列
enzymes 显示酶切位点
features 显示特征序列
show top toolbars 显示顶部工具
show side toolbars 显示侧端工具
customize top toolbar自定义顶部工具栏
description panel 说明面板
zoom controls 焦距控制
font size 字体大小
map/sequence options 图谱和序列设定
translation options 翻译设定
flip sequence 翻转序列
set origin 设定原点
align with a sequence trace 跟另一个序列对比
4.enzymes：都是关于酶切位点的，很简单，第一次用的时候选择常用酶切位点，保存设置。
